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Y187 Strain
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0574-87157013
mingzhoubio@163.com
浙江省寧波市鎮(zhèn)海區(qū)莊市街道興莊路9號
創(chuàng)e慧谷42號樓B幢401室
Y187 Strain
Y187 Strain
規(guī)格:
貨期:
編號:B98230
品牌:Mingzhoubio
標準菌株
定量菌液
DNA
RNA
規(guī)格:
凍干粉
凍干粉:凍干菌粉、凍干管,一次性用完、不得留存
斜面
斜面:活化好的菌,可直接使用,短期保藏,取用方便
甘油
甘油:-80度保存,一次性用完、不得留存
平板
平板:冷卻凝固后的固體培養(yǎng)基在無菌培養(yǎng)皿中形成的培養(yǎng)基固體平面
規(guī)格:
10mL
定量菌液:10ml
50mL
定量菌液:50ml
規(guī)格:
凍存管:5ug/支
DNA
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商品簡介
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產(chǎn)品名稱
Y187 Strain
商品貨號
B98230
規(guī)格
100μl
儲存
-20℃
基因型
MATα, ura3-52, his3-200, ade 2-101, trp 1-901, leu 2-3, 112, gal4Δ, met–, gal80Δ, URA3 : : GAL1UAS-GAL1TATA-lacZ, MEL1
基本信息
培養(yǎng)基:YPDA 菌株類別:酵母雜交菌 培養(yǎng)條件:28℃,有氧,YPDA 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化:PEG/liAC;電轉(zhuǎn) 保存方式:30%甘油,-20℃ 基本應用:酵母雙雜交
菌株簡介
Y187菌株是Clontech公司開發(fā)的GAL4系統(tǒng)酵母單雜,雙雜實驗用菌株,MATα型,可直接轉(zhuǎn)化質(zhì)粒或與MATa型酵母菌株(Y2HGold,AH109等)通過mating操作進行篩庫試驗。,Transformation marker為: trp1, leu2,報告基因為:lacZ, MEL1。Y187 -GAL4酵母雙雜系統(tǒng)需要兩種質(zhì)粒配套使用:PGBKT7和PGADT7。質(zhì)粒PGBKT7的篩選標志為TRP1,用于表達DNA-BD(來自酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4N端1~ 174位氨基酸)與目標蛋白(Bait)的融合蛋白;質(zhì)粒PGADT7的篩選標志為LEU,用于表達AD(GAL4 C端768 ~881 位氨基酸)與目標蛋白(Prey)的融合蛋白。GAL4系統(tǒng)原理:一個完整的酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4可分為功能上相互獨立的兩個結(jié)構(gòu)域:位于N端1 ~ 174位氨基酸區(qū)段的DNA結(jié)合域(DNA-BD)和位于C端768 ~881 位氨基酸區(qū)段的轉(zhuǎn)錄激活域(AD)。DNA-BD能夠識別GAL4-responsive gene的上游激活序列UAS,并與之結(jié)合。而AD可以啟動UAS下游的基因進行轉(zhuǎn)錄。BD和AD單獨存在不能激活轉(zhuǎn)錄,但當二者接近時,則呈現(xiàn)完整的GAL4活性,使含有UAS的啟動子下游基因轉(zhuǎn)錄表達。正常條件下,BD不與AD結(jié)合,將要檢測的蛋白質(zhì)分別與BD和AD融合,形成 bait 融合蛋白(bait -BD)和 prey 融合蛋白(prey-AD),如果 bait 和 prey發(fā)生相互作用,就會促使 BD 和 AD 的相互接近,形成完整的GAL4,從而激活報告基因的轉(zhuǎn)錄。Y187有兩個報告基因:lacZ, MEL1,分別由兩種不同的啟動子(G1,M1)啟動,這兩種啟動子只有GAL4識別的17bp核心區(qū)相同,其余部分均不同,大大降低了酵母雙雜假陽性發(fā)生的概率.Y187菌株可用YPDA在28℃有氧的條件下培養(yǎng),使用30%的甘油保藏菌種。
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