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微孔濾膜過濾除菌實(shí)驗(yàn)

簡介

過濾除菌是通過機(jī)械作用濾去液體或氣體中細(xì)菌的方法。根據(jù)不同的需要選用不同的濾器 和濾板材料。此法除菌的最大優(yōu)點(diǎn)是可以不破壞溶液中各種物質(zhì)的化學(xué)成分,但由于濾量有限,所以一般只適用于實(shí)驗(yàn)室中小量溶液的過濾除菌,較大量溶液的濾菌裝置,如水的細(xì)菌學(xué)檢査,見濾膜法測(cè)定水中大腸菌群實(shí)驗(yàn)。 原理
微孔濾膜過濾器是由上下二個(gè)分別具有出口和入口連接裝置的塑料蓋盒組成,出口處可連接針頭,入口處可連接針筒,使用時(shí)將濾膜裝入兩塑料蓋盒之間,旋緊蓋盒,當(dāng)溶液從針筒注入濾器時(shí),此濾器將各種微生物阻留在微孔濾膜上面,從而達(dá)到除菌的目的。根據(jù)待除菌溶液量的多少,可選用不同大小的濾器。
材料與儀器
肉湯蛋白胨平板 2% 的葡萄糖溶液 注射器 微孔濾膜過濾器 0.22μm 濾膜 無菌試管 鑷子 玻璃刮棒
步驟
1. 組裝、滅菌 將 0.22 μm 孔徑的濾膜裝入清洗干凈的塑料濾器中,旋緊壓平,包裝滅菌后待用(0.1 MPa, 121.5℃ 滅菌 20 min)。
2. 連接 將滅菌濾器的入口在無菌條件下,以無菌操作方式連接于裝有待濾溶液(2% 葡萄糖溶液)的注射器上,將針頭與出口處連接并插入帶橡皮塞的無菌試管中,見圖 VI-5。
3. 壓濾 將注射器中的待濾溶液加壓緩緩擠入過濾到無菌試管中,濾畢,將針頭拔出。
4. 無菌檢査 無菌操作吸取除菌濾液 0.1 ml 于肉湯蛋白胨平板上,涂布均勻,置 37℃ 溫室中培養(yǎng) 24 h,檢査是否有菌生長。
5. 清洗 棄去塑料濾器上的微孔濾膜,將塑料濾器清洗干凈,并換上一張新的微孔濾膜,組裝包扎,再經(jīng)滅菌后使用。
注意事項(xiàng)
1. 壓濾時(shí),用力要適當(dāng),不可太猛太快,以免細(xì)菌被擠壓通過濾膜。
2. 整個(gè)過程應(yīng)在無菌條件下嚴(yán)格無菌操作,以防污染。過濾時(shí)應(yīng)避免備連接處出現(xiàn)滲透現(xiàn)象。
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